反义乙型肝炎病毒S基因T载体克隆的构建

作者：李朵璐; 余祖江; 阚全程

来源：郑州大学学报(医学版), 2009, (05): 963-965.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2009.05.009

• 肝炎病毒,乙型
• S基因
• 反义
• T载体

目的:构建含部分乙型肝炎病毒(HBV)S基因反义序列的基因克隆。方法:根据GenBank中HBVS基因序列和计算机软件mCLONE分析的结果,设计S基因2侧引物,直接扩增出适合长度的反义HBVS基因,与PMD18T载体连接后转化DH5α,筛选阳性克隆,抽提重组质粒并进行PCR及酶切鉴定,再行序列分析。结果:获得226bp含限制性内切酶位点的阳性产物,T载体克隆经PCR及酶切鉴定和序列分析后证实,克隆片段的反向序列与GenBank中该基因的序列同源性为97%。结论:成功构建了含反义HBVS基因部分序列的T载体克隆。

• 单位
  郑州大学第一附属医院