miR-187-3p调控FOXK1/NF-κB信号通路影响破骨细胞增殖、凋亡及分化的分子机制

作者：张涛; 杨扉扉; 王藜篥; 黄华; 张松; 曹永飞

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(05): 1128-1133.

• miR-187-3p
• 叉头框转录因子(FOX)K1
• 核因子(NF)-κB信号通路
• 骨质疏松
• 破骨细胞

目的 探讨miR-187-3p对破骨细胞增殖、凋亡、分化的影响及其对叉头框转录因子(FOX)K1/核因子(NF)-κB信号通路的调控作用。方法 选取49例骨质疏松(OP)患者为OP组，同时选取绝经后骨质疏松性无骨折患者49例为control组；18只SPF级雌性大鼠，分为正常组与模型组，每组9只；原代分离培养OP大鼠破骨细胞，miR-NC、miR-187-3p mimics、pcDNA-NC、pcDNA-FOXK1、miR-187-3p mimics与pcDNA-NC、miR-187-3p mimics与pcDNA FOXK1转染入破骨细胞；采用实时荧光定量聚合酶链反应(qRT-PCR)与Western印迹分别检测OP患者血清与破骨细胞中miR-187-3p、FOXK1的表达量；采用qRT-PCR法检测破骨细胞中耐酒石酸酸性磷酸酶(Acp)-5、基质金属蛋白酶(MMP)9、组织蛋白酶(Cathepsin K)、整合素(Integrinαv)的表达量；采用噻唑蓝(MTT)法检测细胞活力；采用流式细胞术检测细胞凋亡率；双荧光素酶报告基因实验检测miR-187-3p与FOXK1的靶向关系；Western印迹检测Ki-67、半胱氨酸天冬氨酸蛋白水解酶(Cleaved-caspase)-3、p-p65、p-核因子κB抑制蛋白(IкB)α蛋白表达量。结果 与control组比较，OP组血清中miR-187-3p表达水平明显降低，FOXK1表达水平明显升高(均P<0.05);与正常组比较，模型组miR-187-3p表达水平明显降低，FOXK1表达水平明显升高(均P<0.05);与miR-NC组比较，miR-187-3p组细胞活力明显降低，细胞凋亡率明显升高，Ki-67、Acp-5、MMP9、Cathepsin K、Integrinαv、p-p65、p-IкBα表达水平明显降低，Cleaved-caspase-3蛋白水平明显升高(均P<0.05);与pcDNA-NC组或miR-187-3p+pcDNA-NC组比较，pcDNA-FOXK1组或miR-187-3p+pcDNA-FOXK1组细胞活力明显升高，细胞凋亡率明显降低，Ki-67、Acp-5、MMP9、Cathepsin K、Integrinαv、p-p65、p-IкBα表达水平明显升高，Cleaved-caspase-3蛋白水平明显降低(均P<0.05);双荧光素酶报告基因实验证实FOXK1是miR-187-3p的靶基因。结论 miR-187-3p过表达可通过下调FOXK1的表达从而抑制破骨细胞增殖、分化及促进破骨细胞凋亡，其作用机制与抑制NF-κB信号通路的活化有关。

• 单位
  贵州省骨科医院