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摘要
目的 在悬浮中国仓鼠卵巢细胞（Chinese hamster ovary cells, CHO-S）中分泌表达、纯化重组hCGH-CTP融合蛋白，验证其对3T3-L1成熟脂肪细胞脂质积累的影响。方法 构建CTP连接肽融合人糖蛋白激素β5/α2重组蛋白表达载体pcDNA3.1-rhCGH-CTP,将其瞬时转染CHO-S悬浮细胞中，大量表达纯化并验证rhCGH-CTP蛋白生物学活性；通过干预3T3-L1成熟脂肪细胞24 h,观察细胞内甘油三酯（TG）水平的变化。结果 Western blot结果显示，rhCGH-CTP蛋白在CHO-S细胞中成功表达，表达量可达715.4 mg·L-1;用AKTA pure蛋白纯化系统纯化蛋白，SDS-PAGE方法鉴定纯化出的蛋白纯度较高可达90%。此外，在高表达TSHR基因的成熟脂肪细胞3T3-L1中，利用ELISA试剂盒测定不同浓度rhCGH-CTP蛋白干预后胞内cAMP含量明显升高，说明rhCGH-CTP蛋白具有生物活性；油红O染色结果发现，与对照组相比，不同浓度rhCGH-CTP蛋白干预组的成熟脂肪细胞中TG含量明显降低（P<0.05）。结论 成功表达并纯化了rhCGH-CTP融合蛋白，其具有良好的生物学活性并能有效降低TG,该研究为后续深入揭示CGH蛋白的生理作用及在临床实践中的潜在应用提供了重要基础。
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