烟草C3HC4型锌指蛋白的原核表达及转基因植株功能研究

作者：伍文宪; 杨秀芬; 刘勇; 邱德文

来源：生物技术通报, 2014, (07): 100-105.

DOI：10.13560/j.cnki.biotech.bull.1985.2014.07.025

• 锌指蛋白
• 重组表达
• 转基因烟草
• 抗病性

植物中C3HC4型RING锌指蛋白在泛素化、光形态建成、抗逆及生长发育等过程中均起到非常重要的作用。首次从本生烟中扩增获得一个锌指蛋白基因的完整阅读框,编码203个氨基酸,含有C3HC4型锌指结构域,命名为NbZFP1。将NbZFP1基因分别克隆到原核表达系统载体pGEX-6P-2以及pMAL-C2X中,成功构建了重组表达载体pGEX-6P-2-NbZFP1与pMALC2X-NbZFP1,经IPTG获得了大量可溶性表达的NbZFP1融合蛋白。将NbZFP1基因克隆于植物表达载体pBI121中,通过农杆菌介导法获得转基因烟草,PCR检测及Southern blot分析表明NbZFP1基因已整合到烟草基因组中,转NbZFP1基因烟草表现出株型紧凑,节间缩短,茎干粗壮和对TMV抗性增强。

• 单位
  中国农业科学院植物保护研究所; 四川省农业科学院植物保护研究所