青蒿素联合氯喹治疗通过阻断NF-κB通路抑制胶原蛋白诱导性关节炎小鼠的炎症反应

作者：吕昌伟; 张静涛; 郗海涛; 强毅; 张乾^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2022, 38(07): 632-639.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.009414

• 青蒿素
• 氯喹
• 胶原蛋白诱导性关节炎
• 信号转导子和转录激活子3(STAT3)
• 核因子κB p65(NF-κB p65)

目的 探究青蒿素联合氯喹对胶原蛋白诱导性关节炎(CIA)小鼠前爪厚度、促炎酶含量、巨噬细胞浸润和分化的影响以及作用机制。方法 小鼠注射牛Ⅱ型胶原蛋白建立CIA模型，随机分为CIA组、青蒿素(33.3 mg/kg)组、氯喹(33.3 mg/kg)组和联合治疗组(各16.7 mg/kg),健康小鼠作为对照组，每组8只。治疗组灌胃给药，CIA模型组和对照组给予相同剂量的生理盐水，连续灌胃18 d。记录各组小鼠前爪厚度和关节炎评分的变化，ELISA检测小鼠血清中的免疫球蛋白含量和炎症因子含量。实时定量PCR检测小鼠前爪组织以及巨噬细胞环加氧酶2(COX2)、诱导型一氧化氮合酶(iNOS)、 CD86、 CD80、 CD163、精氨酸酶1(Arg1)、 CC趋化因子受体2(CCR2)、 CCR3、 CCR4、 CCR5、白细胞介素6(IL-6)的mRNA表达；Western blot法检测小鼠前爪组织和RAW264.7巨噬细胞COX2、 iNOS、信号转导子和转录激活子3(STAT3)、磷酸化的STAT3(p-STAT3)和核因子κB p65(NF-κB p65)蛋白表达。脂多糖(LPS)刺激RAW264.7细胞诱发炎症，将细胞随机分为LPS组、青蒿素(20μmol/L)组、氯喹(20μmol/L)组和联合治疗组(青蒿素5μmol/L,氯喹10μmol/L)组，未处理细胞为对照组，CCK-8法检测细胞活力。结果 与对照组相比，CIA组小鼠显著增加关节炎评分和前爪厚度，上调M1分化蛋白CD86和CD80 mRNA水平，但下调M2分化蛋白CD163和Arg1/iNOS mRNA水平以及酶COX2和iNOS mRNA和蛋白水平；药物单独以及联合治疗均降低炎症评分和前爪厚度，下调CD86和CD80 mRNA水平，但上调CD163和Arg1/iNOS mRNA水平和COX2和iNOS的mRNA和蛋白水平；LPS诱导的巨噬细胞细胞活力增加，药物处理后细胞活力降低。CIA小鼠前爪组织或LPS诱导的巨噬细胞的IL-6 mRNA水平、 p-STAT3和NF-κB p65的蛋白表达量均上调，治疗则均可逆转上述作用。结论 青蒿素联合氯喹的治疗效果优于药物单药治疗的效果；青蒿素联合氯喹通过阻断NF-κB通路缓解CIA小鼠关节炎。

• 单位
  西安市第三医院