HIV-TATm-Survivin(T34A)高表达大肠杆菌BL21(DE3)菌株的自适应进化筛选及其特性

作者：姚雪凌; 王恒伟; 王玮; 王风清; 魏东芝

来源：华东理工大学学报, 2010, (02): 203-210.

DOI：10.14135/j.cnki.1006-3080.2010.02.001

• 大肠杆菌
• 重组蛋白
• 自适应进化
• 菌种保存
• 发酵放大
• HIV-TATm-Survivin(T34A) Escherichia coli
• recombinant protein
• adaptive evolution
• bacteria preservation
• fermentation scale up
• HIV-TATm-Survivin(T34A)

表达蛋白HIV-TATm-Survivin(T34A)的重组大肠杆菌BL21(DE3)在长时间保存后其表达水平明显下降,发酵罐放大难以顺利进行。利用该蛋白的本底表达对宿主菌产生的生长压力进行了实验室自适应进化工作,得到携带相同质粒但表达水平呈两极分化的两类菌株HTS1和HTS2。摇瓶培养时,HTS1菌株生长较迅速,但重组蛋白几乎无表达;HTS2生长较缓慢,却可以高效积累重组蛋白。因此HTS1菌株的出现,可能是原始菌株长时间保存后蛋白表达能力下降的原因之一。另外,HTS2菌株应用上的优势,外源添加高达300 mmol/L的乙酸钠对HIV-TATm-Survivin(T34A)的表达水平没有较明显...

• 单位
  华东理工大学; 生物反应器工程国家重点实验室