Naa20通过抑制AIM2表达减轻脓毒症心肌损伤

作者：刘畅; 范彩红; 刘佳; 刘亚珊; 张诗琪; 刘士铭; 申艳娜^*

来源：天津医药, 2023, 51(10): 1065-1070.

• 细胞焦亡
• Naa20
• AIM2
• 心肌损伤

目的 探究Naa20在脂多糖（LPS）脓毒症心肌损伤中的调控作用及机制。方法 12只雄性C57BL/6J小鼠随机分为对照组和模型组，每组6只。模型组采用LPS一次性尾静脉注射方法造模，对照组注射同等剂量的磷酸盐缓冲液（PBS）。LPS注射12 h后采用心脏多普勒超声检测各组小鼠心脏功能；酶联免疫吸附试验（ELISA）检测各组小鼠血清中肌酸激酶同工酶（CK-MB）表达水平；苏木精-伊红（HE）染色观察各组小鼠心肌损伤程度。在体外分离、培养SD大鼠乳鼠心肌细胞，随机分为对照组和LPS处理组。荧光探针检测心肌细胞中线粒体膜电位和活性氧（ROS）释放情况；Western blot检测心肌细胞中黑色素瘤缺失因子2(AIM2)、消皮素D(GSDMD)、活化的GSDMD(GSDMD-N)、白细胞介素（IL）-1β、活化的IL-1β(p17)和Naa20的蛋白表达水平；ELISA检测心肌细胞上清液中IL-1β含量；实时荧光定量PCR(qPCR)检测心肌细胞中Naa20的表达。H9c2心肌细胞分为对照组、Naa20对照组、LPS组和Naa20+LPS组，四甲基偶氮唑盐（MTT）和乳酸脱氢酶（LDH）实验检测心肌细胞活力；免疫共沉淀检测Naa20与AIM2的结合情况。结果 与对照组相比，模型组小鼠左心室射血分数（LVEF）、短轴缩短率（FS）降低，血清中CK-MB含量增加（P<0.01），小鼠心肌出现病理改变。体外实验结果表明，与对照组相比，LPS处理组心肌细胞线粒体膜电位降低，ROS释放增多，AIM2、GSDMD、GSDMD-N、IL-1β、p17和Naa20的蛋白表达水平增加，上清液中IL-1β含量增多（P<0.05）。免疫共沉淀证实Naa20与AIM2结合。与LPS组相比，Naa20+LPS组心肌细胞活力增强，AIM2乙酰化修饰增多，AIM2、GSDMD和GSDMD-N的蛋白表达水平降低，上清液中IL-1β含量降低（P<0.05）。结论 Naa20可通过调节AIM2蛋白表达调控心肌细胞焦亡，减轻心肌损伤。

• 单位
  天津医科大学