不同培养条件下鼠疫菌PhoP/PhoQ的自调控模式研究

作者：张义全; 方海红; 刘磊; 黄新祥; 杨瑞馥; 周冬生; 杨慧盈

来源：军事医学, 2017, 41(05): 373-376.

• 鼠疫耶尔森菌
• YPO1635
• phoP
• 调控

目的研究鼠疫耶尔森菌PhoP/PhoQ在不同培养条件下的自调控关系。方法 PCR扩增YPO1635启动子区DNA序列,并克隆入pRW50质粒β-半乳糖苷酶基因的上游,构建LacZ重组质粒,进而将该重组质粒转入鼠疫菌野生株(WT)和phoP突变株(ΔphoP)中,通过测定二者中β-半乳糖苷酶活性差异来判定PhoP对YPO1635的调控关系。提取WT和ΔphoP的总RNA,采用引物延伸实验研究phoP的转录起始位点,并根据产物的丰度判断PhoP对phoP的调控关系。结果 LacZ结果表明,在低Mg~(2+)TMH和BHI培养基中,PhoP能激活YPO1635的转录,而在高Mg~(2+)TMH中,PhoP对YPO1635的转录无调控作用。引物延伸结果显示,phoP有两个转录起始位点G(-90)和A(-118)(分别记为P1和P2,翻译起始位点为+1),在低Mg~(2+)TMH中,PhoP能激活P1的转录,而对P2无调控作用;在高Mg~(2+)TMH中,PhoP对二者均无调控作用;在BHI中,PhoP对二者的转录均具抑制作用。结论PhoP/PhoQ的自调控关系随周围环境的变化而表现出不同的模式,这有利于鼠疫菌快速适应外界生存环境的改变。

• 单位
  江苏大学; 军事医学科学院; 病原微生物生物安全国家重点实验室