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摘要
高效快速植物基因型鉴定是现代分子育种及分子生物研究中基因定位与克隆的前提条件，因而快速且高通量的取样技术有利于建立高效快速植物基因型鉴定技术体系。随着高通量测序技术的飞速发展，可对重要遗传材料进行重测序来进行全基因组范围内基因型鉴定，但因成本及鉴定周期等限制，该技术尚难应用于大群体遗传材料的图位克隆及基于基因型鉴定的分子育种。虽然目前已有多种不同的植物叶片取样方法、DNA提取方法，但步骤繁琐，耗时较长，或所需要特殊的仪器设备，其效率并不能满足现代高通量的技术需求。本研究以外直径为3.0 mm的塑料圆管结合木质牙签为简易的取样器，将大豆叶片均匀准确地取样至384深孔微孔板，同时优化了配套的DNA提取方法与步骤，建立了一整套的高效大豆植株基因型鉴定流程。本鉴定技术体系可大大提高工作效率，缩短鉴定周期。应用该技术流程，成功地对杂合型洐生后代群体1 150个植株个体进行了基因型鉴定，确定了与黄化突变相关分子标记之间的联系，为进一步精细定位与克隆控制黄化突变基因奠定了基础。本研究所建立的植物组织高效取样法及基因型鉴定流程可扩展应用于水稻、玉米等多种作物的基因克隆研究与分子育种中。
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单位中国科学院东北地理与农业生态研究所; 生命科学学院; 长春师范大学
