人组氨酸磷酸酶PHP14的原核表达及其体外互作蛋白的研究

徐安健; 蒋单懿; 黄凌云; 谷俊朝; 肖雪媛; 何大澄

doi:10.13523/j.cb.20100702

摘要

目的:表达和纯化人组氨酸磷酸酶PHP14蛋白,并寻找与其存在体外相互作用的蛋白。方法:PCR扩增PHP14的全长cDNA,并将其克隆至pGEX4T原核表达载体,构建重组表达质粒。用重组表达质粒转化大肠杆菌BL21菌株,经IPTG诱导后,使用Glutathione Sepharose 4B凝胶颗粒进行亲和纯化,通过SDS-PAGE电泳确定融合蛋白的表达。进行GST-Pulldown实验,寻找体外与PHP14相互作用的蛋白,并进行质谱鉴定。结果:在大肠杆菌BL21中成功了表达出了PHP14的可溶性融合蛋白;经Glutathione Sepharose4B凝胶颗粒纯化后,获得了纯化的GST-PHP1...

单位
北京师范大学; 首都医科大学附属北京友谊医院; 北京热带医学研究所

全文

访问全文

收藏分享被引浏览

更新时间：2019-10-15 20:10

人组氨酸磷酸酶PHP14的原核表达及其体外互作蛋白的研究

摘要

全文

产品服务

站内浏览

服务支持

联系方式

科研之友