基质金属蛋白酶抑制剂-1基因的RNA干扰载体构建及其抑制效应

作者：张素梅; 谢玉梅; 郝春秋; 康文臻; 张颖; 姜娜; 马力; 彭梅娟; 贾战生

来源：临床肝胆病杂志, 2012, (02): 135-138.

• 金属蛋白酶组织抑制剂
• RNA干扰
• 肝硬化 tissue inhibitor of metalloproteinase
• RNA interference
• liver cirrhosis

目的构建含有基质金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)基因特异性RNA干扰序列的慢病毒vshRNA载体,筛选有效靶点序列。方法通过在线软件设计TIMP-1基因的RNA干扰(RNAi)序列,按siRNA设计的优化原则筛选靶序列,构建含有TIMP-1基因特异性慢病毒vshRNA载体。将重组pEGFP-N1-3FLAG-TIMP-1质粒和慢病毒质粒pGCSIL-GFP-shRNA共转染293T细胞,转染48 h后收集细胞,抽提总蛋白进行Western Blot检测,筛选抑制效应较好的质粒。结果依次通过在线软件设计序列、优化筛选、BLAST比对等方法,选择4条作为靶序列,又经Western Blot检测...

• 单位
  第四军医大学