应用酵母双杂交系统筛选人胃黏膜上皮组织SHIP2的相互作用蛋白

作者：徐良; 钱学艺; 任林; 邵玉玲; 李允允; 叶艳^*

来源：细胞与分子免疫学杂志, 2019, 35(11): 1000-1007.

DOI：10.13423/j.cnki.cjcmi.008889

• 酵母双杂交系统
• 胃癌
• 含Src同源蛋白2肌醇-5-磷酸酶2(SHIP2)
• 抗增殖蛋白1 (prohibitin1/PHB)

目的通过酵母双杂交系统筛选人胃黏膜上皮组织标准均一化cDNA文库,寻找与含Src同源蛋白2肌醇-5-磷酸酶2(SHIP2)相互作用的蛋白。方法利用酵母双杂交系统,以SHIP2的P1(SH2+5-Ptase)和P2(PRD+SAM)段作为诱饵蛋白,筛选出人胃黏膜上皮组织均一化cDNA文库中与SHIP2相互作用的蛋白,并通过免疫共沉淀法进行验证。结果挑选出39个阳性克隆,经测序比对分析,回复性杂交,免疫共沉淀试验验证,最终确定一个与SHIP2相互作用的蛋白抗增殖蛋白1(prohibitin1/PHB)。结论酵母双杂交系统筛选人胃黏膜上皮组织SHIP2的相互作用蛋白PHB。

• 单位
  基础医学院; 安徽医科大学; 皖南医学院第一附属医院