禾谷炭疽菌CgRab5A的亚细胞定位研究

作者:刘涵; 孟成真; 刘玉青; 李秀红; 石晓玲; 齐尧尧*; 张桂玲*
来源:安徽农学通报(上半月刊), 2019, 25(22): 99-102.
DOI:10.16377/j.cnki.issn1007-7731.2019.22.038

摘要

为明确禾谷炭疽菌(Colletotrichum graminicola)中CgRab5A(GLRG00019)蛋白在细胞内的定位特点,利用多片段一步克隆法将CgRab5A自身启动子、GFP片段和CgRab5A开放阅读框(ORF)片段克隆到pKNT载体上,转化野生型禾谷炭疽菌的原生质体后,通过新霉素抗性筛选获得阳性候选转化子,利用共聚焦显微镜观察GFP-CgRab5A在菌丝和孢子内的定位情况。结果表明,一步克隆法获得的pKNT-GFP-CgRab5A重组载体经测序后序列完全正确,亚细胞定位观察发现GFP-CgRab5A在菌丝和孢子细胞内均呈点状分布,定位于早期内涵体上,暗示其可能参与早期内涵体的相关调控过程。

全文