摘要
目的:观察电针对骶上脊髓损伤(SSCI)后逼尿肌反射亢进型大鼠尿流动力学及脊髓组织中丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶(Raf)与丝裂原活化的细胞外信号调节激酶(MEK)及细胞外信号调节激酶1/2(ERK1/2)信号通路的影响,探讨电针改善SSCI后逼尿肌反射亢进型大鼠膀胱功能的可能机制。方法:72只SD大鼠随机分为空白组和假手术组各12只,其余48只大鼠采用脊髓横断法造模,在符合模型标准的大鼠中随机抽取36只分为模型组、电针组和电针+PD98059组各12只。电针组大鼠于“次髎”“中极”“三阴交”“大椎”给予电针治疗,20 min/次,1次/d,连续7 d;电针+PD98059组大鼠在同样电针干预前2 h给予腹腔注射PD98059(5 mg/kg)。采用尿流动力学检测大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力、最大容量及顺应性,HE染色观察大鼠膀胱逼尿肌组织形态,用TUNEL法测定脊髓组织细胞凋亡情况,用Western blot法检测脊髓组织中环磷酸腺苷直接激活交换蛋白2(Epac2)、小分子G蛋白Rap、磷酸化(p)-Raf、 p-MEK、 p-ERK 1/2、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)、Bcl-2相关蛋白X(Bax)的表达。结果:与假手术组比较,模型组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均升高(P<0.01),而膀胱最大容量减少(P<0.01),膀胱顺应性降低(P<0.01),脊髓组织细胞凋亡率升高(P<0.01),脊髓组织Epac2、Rap、p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平降低(P<0.01),Bax蛋白表达水平升高(P<0.01)。与模型组比较,电针组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均降低(P<0.05),膀胱最大容量增加(P<0.05),膀胱顺应性升高(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率降低(P<0.05),脊髓组织Epac2、Rap、p-Raf、p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平升高(P<0.05,P<0.01),Bax蛋白表达水平降低(P<0.05)。与电针组比较,电针+PD98059组大鼠膀胱基础压、漏尿点压、最大压力均升高(P<0.05),膀胱最大容量减少(P<0.05),膀胱顺应性降低(P<0.05),脊髓组织细胞凋亡率升高(P<0.05),脊髓组织p-MEK、p-ERK1/2及Bcl-2蛋白表达水平均降低(P<0.05),Bax蛋白表达水平升高(P<0.05)。HE染色结果显示,空白组和假手术组大鼠膀胱逼尿肌组织细胞排列紧密整齐,细胞形态完整;模型组大鼠膀胱逼尿肌移行上皮细胞排列紊乱,固有膜被破坏,伴单核细胞浸润;与模型组比较,电针组膀胱逼尿肌组织弹性纤维增生程度减轻,肌纤维排列层次较清晰,可观察到更多形态饱满的完整细胞;与电针组比较,电针+PD98059组逼尿肌组织肌纤维排列层次欠清晰,细胞间隙大。结论:电针可改善SSCI后逼尿肌反射亢进型大鼠的膀胱功能,其机制可能与电针上调脊髓Epac2、Rap,启动Raf-MEK-ERK级联反应,减少细胞凋亡,改善膀胱神经支配有关。
- 单位