兔源PP1催化亚基突变体的原核表达及活性分析

作者：范亚军; 倪秀珍

来源：黑龙江畜牧兽医, 2016, (23): 213-215.

DOI：10.13881/j.cnki.hljxmsy.2016.2333

• 兔源
• 蛋白磷酸酶(PP)
• 突变体
• 原核表达
• 异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)
• 活性检测

为了探讨蛋白磷酸酶(PP)催化亚基非保守区N末端结构与功能之间的关系,试验利用原核生物表达兔源蛋白磷酸酶催化亚基突变体DN8PP1,以DEAE FF和Heparin FF对目的蛋白进行分离、纯化并对其活性进行分析。结果表明:加入异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)后成功诱导突变体蛋白在大肠杆菌中表达,对蛋白进行分离、纯化时含0.15 mol/L NaCl的Buffer A洗脱出目的蛋白,以pNPP为底物检测活性。说明突变体蛋白具有脱磷酸化的生物学活性。

• 单位
  长春师范大学; 生命科学学院