转录因子Krüppel样因子4抑制骨髓间充质干细胞向髓核样细胞分化研究

作者：王亚寒^*; 罗建平; 王小刚; 杨彬; 张新胜

来源：中华实验外科杂志, 2019, 36(01).

• Krüppel样因子4
• 骨髓间充质干细胞
• 髓核细胞
• 增殖
• 分化

目的观察Krüppel样因子4(KLF4)对转化生长因子(TGF)-β1诱导的人骨髓间充质干细胞(BMSCs)向髓核样细胞分化的影响。方法实时定量聚合酶链反应(Real-time PCR)和Western blot检测TGF-β1诱导BMSCs 7 d和14 d对KLF4 mRNA和蛋白表达的影响;建立KLF4过表达BMSC细胞株, 用TGF-β1诱导7 d或14 d, 细胞计数试剂盒(CCK-8)检测细胞增殖, Real-time PCR和Western blot分析髓核细胞相关蛋白聚集蛋白聚糖(Aggrecan)、Ⅱ型胶原蛋白α1链(Col2A1)、性别决定区Y框蛋白9(SOX9)、角蛋白19(KRT19)和叉头蛋白(FOXF1)表达。结果与对照组比较, TGF-β1诱导后KLF4 mRNA和蛋白表达均显著降低(第7天mRNA:0.653±0.083比1.027±0.068, t=6.012, P<0.01;第14天mRNA:0.453±0.065比1.063±0.096, t=9.105, P<0.01;第7天蛋白, 0.601±0.112比0.873±0.051, t=3.874, P<0.05;第14天蛋白:0.251±0.087比0.893±0.078, t=9.543, P<0.01), 细胞增殖增加(第7天, 166.355±11.132比99.647±6.220, t=9.064, P<0.01;第14天:195.333±10.512比124.667±9.609, t=8.598, P<0.01), Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan:2.600±0.255比1.017±0.095, t=10.07, P<0.01;Col2A1:3.441±0.259比1.010±0.076, t=15.58, P<0.01;SOX9:2.767±0.139比1.033±0.111, t=16.92, P<0.01;KRT19:3.710±0.210比1.005±0.076, t=20.95, P<0.01;FOXF1:2.783±0.174比1.035±0.132, t=13.88, P<0.01)和蛋白(Aggrecan:0.760±0.072比0.233±0.055, t=10.05, P<0.01;Col2A1:0.941±0.046比0.190±0.040, t=21.36, P<0.01;SOX9:1.237±0.140比0.317±0.065, t=10.31, P<0.01;KRT19:0.897±0.072比0.137±0.051, t=14.84, P<0.01;FOXF1:1.033±0.191比0.181±0.056, t=7.434, P<0.01)表达升高。与TGF-β1单独处理比较, 过表达KLF4抑制了细胞增殖(第7天:125.750 ±10.386比166.355±11.132, t=4.620, P<0.05;第14天:148.526±13.449比195.333±10.512, t=4.702, P<0.01), 降低了Aggrecan、Col2A1、SOX9、KRT19、FOXF1 mRNA (Aggrecan:1.510±0.187比2.600±0.255, t=5.970, P<0.01;Col2A1:1.727±0.254比3.441±0.259, t=8.176, P<0.01;SOX9:1.493±0.169比2.767±0.139, t=10.08, P<0.01;KRT19:2.117±0.387比3.710±0.210, t=6.273, P<0.01;FOXF1:1.550±0.125比2.783±0.174, t=9.978, P<0.01)和蛋白(Aggrecan:0.423±0.093比0.760±0.072, t=4.958, P<0.01;Col2A1:0.490±0.079比0.941±0.046, t=8.504, P<0.01;SOX9:0.560±0.096比1.237±0.140, t=6.890, P<0.01;KRT19:0.375±0.047比0.897±0.072, t=10.49, P<0.01;FOXF1:0.537±0.097比1.033±0.191, t=4.017, P<0.05)表达。结论 KLF4过表达可抑制BMSC细胞增殖和向髓核样细胞分化。

• 单位
  河南省人民医院