DNMTl siRNA对人胰腺癌PaTu8988细胞周期的调控机制研究

作者：徐岷; 高军; 高道键; 张玉琦; 杜奕奇; 刘枫; 龚燕芳; 吴洪玉; 李兆申

来源：解放军医学杂志, 2009, 34(01): 21-23.

• 位点特异性DNA甲基转移酶(胞嘧啶特异性)
• RNA干扰
• 胰腺肿瘤
• 细胞周期

目的研究沉默DNA甲基转移酶1(DNMTl)基因对人胰腺癌PaTu8988细胞增殖和细胞周期的影响及可能机制。方法培养的人胰腺癌PaTu8988细胞分为空白对照组、阴性siRNA(15nmol/L)组、阴性siRNA(30nmol/L)组、DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组。转染48h后,采用real-time PCR和Western blotting评价沉默效率和细胞周期调控基因p21的表达情况;WST-8法检测细胞增殖情况;流式细胞技术检测细胞周期变化。结果转染48h后,15nmol/L和30nmol/L浓度的DN-MT1 siRNA均明显抑制了DNMT1 mRNA和蛋白的表达;DNMT1 siRNA转染后人胰腺癌PaTu8988细胞增殖受抑制,各组细胞增殖抑制率依次为0%±12.0%、13.7%±8.2%、23.4%±7.3%、17.1%±5.8%和36.9%±14.2%,其中DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的细胞增殖抑制率明显高于其他各组(P<0.01);DNMT1 siRNA(15nmol/L)组和DNMT1 siRNA(30nmol/L)组的G2/M期细胞百分率均显著低于其他各组,S期细胞百分率明显高于其他各组(P<0.05);DNMT1 siRNA(30nmol/L)组细胞周期调控基因p21 mRNA相对表达量明显高于其他各组(P<0.01)。结论DNMTl siRNA能特异性抑制胰腺癌细胞DNMTl的表达,并抑制细胞增殖、促使细胞出现S期阻滞,其机制可能与上调细胞周期调控基因p21的表达有关。

• 单位
  中国人民解放军第二军医大学; 长海医院