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摘要
草鱼呼肠孤病毒(Grass carp reovirus, GCRV)是导致该病的主要病原,研究将Ⅰ型草鱼呼肠孤病毒GCRV-873株的外衣壳蛋白VP7基因进行原核表达,获得高度纯化VP7重组蛋白,通过免疫BALB/c小鼠,首次制备筛选得到高效价单克隆抗体。结果显示, GCRV-I vp7基因可在原核表达系统中高效表达,主要以包涵体形式存在,大小约为40 kD。免疫小鼠后筛选到了5株IgG类型阳性杂交瘤细胞株,其中3株亚型为IgG1, 2株亚型为IgG2a。Western Blot实验和直接免疫荧光实验显示,该抗体可特异识别GCRV-873,并且ELISA检测原核重组蛋白的效价高达204800,亲和常数为4.04×109。研究制备的VP7蛋白单克隆抗体,为GCRV-I病毒诊断技术开发及病毒感染机制的深入研究提供实验基础。
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