RI-1对MSH2缺陷结直肠癌细胞系的杀伤作用

作者：孔祥玉; 王爽; 王彦; 徐畅; 王芹; 刘强; 杜利清

来源：基础医学与临床, 2017, 37(04): 473-478.

DOI：10.3969/j.issn.1001-6325.2017.04.010

• RI-1
• 结直肠癌细胞
• RAD51
• MSH2

目的探讨RAD51抑制剂RI-1对MSH2缺陷结直肠癌细胞系的杀伤作用及可能的作用机制。方法 Western blot法筛选MSH2差异表达的结直肠癌细胞系,MTT法检测不同结直肠癌细胞系对RI-1(10、20、30、40或50μmol/L)的敏感性;构建针对MSH2基因的重组shRNA慢病毒表达载体并感染HT29细胞。RI-1(40μmol/L)处理细胞,流式细胞术检测细胞凋亡的变化;单细胞凝胶电泳实验分析细胞内DNA损伤情况;细胞免疫荧光法检测γ-H2AX foci的形成。结果与对照组相比MSH2缺陷的HCT8细胞有明显细胞凋亡现象(P<0.01);HCT8细胞和HT29 Shmsh2细胞尾部DNA含量、尾长和尾距均较对照组明显增加(P<0.05);HCT8细胞和HT29 Shmsh2细胞内γ-H2AX foci的形成数量较对照组明显增加(P<0.01)。结论 RAD51抑制剂RI-1可能通过增加细胞内DNA损伤参与RI-1对MSH2缺陷肿瘤的杀伤作用。

• 单位
  中国医学科学院北京协和医学院; 放射医学研究所