具有中和活性的鸭肠炎病毒单克隆抗体的制备与鉴定

作者：王怡平; 张忠伟; 蒲路莎; 赵丽丽^*; 陈洪岩^*

来源：中国兽医科学, 2019, 49(08): 977-982.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2019.0130

• 鸭肠炎病毒
• 单克隆抗体
• 中和活性

为制备抗鸭肠炎病毒(DEV)的单克隆抗体(MAb)并对其生物学活性进行鉴定,本研究采用蔗糖密度梯度离心法提纯DEV鸭胚成纤维细胞适应毒,以此作为抗原免疫BALB/c小鼠,随后取小鼠脾细胞与SP2/0骨髓瘤细胞融合,有限稀释法克隆杂交瘤细胞株,经间接ELISA筛选,获得了1株稳定分泌抗DEV MAb的杂交瘤细胞株2E3。鉴定结果显示,该MAb为Ig M亚类,ELISA效价可达到1∶105以上;间接免疫荧光试验(IFA)中MAb可与细胞中增殖的DEV结合,Western-blot试验中MAb不与变性病毒蛋白作用,表明该MAb可能是构象表位的单抗;病毒中和试验表明,该MAb具有较强的病毒中和活性。上述结果表明,本试验获得的一株具有DEV中和活性的MAb杂交瘤细胞株为建立DEV的检测方法和DEV的相关研究提供了材料支持。

• 单位
  兽医生物技术国家重点实验室; 中国农业科学院哈尔滨兽医研究所