赖型钩端螺旋体溶血素HlyX对血管内皮细胞通透性的影响

作者：孙湛; 吴秉婷; 李道坤; 鲍朗

来源：中国病理生理杂志, 2011, (09): 1682-1686.

• 钩端螺旋体
• HlyX
• 通透性
• 细胞凋亡
• 人脐静脉内皮细胞 Leptospira interrogans
• HlyX
• Permeability
• Apoptosis
• Human umbilical vein endothelial cells

目的:克隆表达赖型钩端螺旋体溶血素基因hlyX,观察其表达产物对人脐静脉内皮细胞(HU-VECs)通透性的影响,并初步探讨其机制。方法:将hlyX基因插入原核表达载体pET32a( ),构建重组质粒pET-hlyX,转化大肠杆菌BL21(DH3)以高效表达携带组氨酸标签的Trx-HlyX融合蛋白,并作亲和层析纯化。采用生物素标记白蛋白的酶联免疫吸附法测定目的蛋白对HUVECs单细胞层通透性的影响,并以流式细胞术及Ho-echst 33258荧光染色方法检测其作用于HUVECs后的细胞凋亡率。结果:成功构建了重组质粒pET-hlyX并高效表达出Trx-HlyX融合蛋白;与对照组相比较,蛋白Trx...

• 单位
  四川大学; 华西医学中心