人偏肺病毒分离株蛋白质特性的初步探讨

作者：黄路; 赵晓东; 张琴; 赵耀; 丁媛

来源：重庆医科大学学报, 2007, (10): 1016-1019.

DOI：10.13406/j.cnki.cyxb.2007.10.002

• 偏肺病毒
• F蛋白
• G蛋白质
• 抗血清

目的:初步明确人偏肺病毒(Human metapneumovirus,hMPV)主要蛋白质的基本特性。方法:以纯化的hMPV重庆分离株CHN05-01灭活病毒为抗原,免疫家兔获得抗血清。用此抗血清为一抗通过免疫印迹法检测hMPV蛋白。用NetNGlyc 1.0 Server、NetOGlyc 3.1 Server、NetPhos 2.0 Server分析hMPVA型标准株CAN97-83氨基酸序列,预测hMPV蛋白氨基酸序列中可能的糖基化、磷酸化位点。结果:ELISA检测显示所制备的抗血清与hMPV的蛋白反应效价达1:500以上,可有效识别hMPV蛋白。软件分析示G蛋白糖基化位点最多,而P蛋白磷酸化位点最多。以兔抗hMPV血清为一抗的免疫印迹法提示CHN05-01的G蛋白糖基化水平较一致,与CAN99-80和CAN99-81不同,其分子量介于55至72ku之间,约68ku;F蛋白F1亚单位分子量介于40至55ku,约为48ku。结论:初步明确了hMPV两个主要膜表面糖蛋白的分子量和糖化特点,为后续蛋白功能研究奠定了基础。

• 单位
  重庆医科大学附属儿童医院; 江西省儿童医院