重组超氧化物歧化酶1/3杂合酶在大肠杆菌中表达的优化

作者：宋筱龄; 范立强; 容智凤; 赵健; 李素霞; 袁勤生

来源：食品与药品, 2008, (11): 8-11.

• 超氧化物歧化酶
• 杂合酶
• 表达
• 优化 superoxide dismutase
• hybrid enzyme
• expression
• optimization

目的获取活性高的重组SOD 1/3杂合酶。方法用含pET-SOD 1/3的工程菌诱导表达重组SOD 1/3杂合酶,通过分析SDS-PAGE及SOD酶活性,考察诱导温度、诱导时间、诱导剂浓度、Cu 2+、Zn 2+浓度对重组酶表达量和活性的影响。结果正交试验表明,用1 mmol/L异丙基-β-D-硫代半乳糖苷(IPTG)在A600=1.2时诱导,Cu2+、Zn2+浓度分别为2.4 mmol/L,诱导温度15℃,诱导时间12 h,能获得高活性重组SOD 1/3,其比活性为1681U/mg。结论培养温度和Cu2+、Zn2+浓度是优化表达的最主要因素。降低诱导温度有利于重组酶的可溶性表达,添加Cu2+...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学