紫檀芪对中波紫外线照射的HaCaT细胞抗氧化物酶表达及活性的影响

作者：邓蕙妍; 李华平; 陈荃; 李润祥; 梁碧华; 高爱莉; 周欣; 朱慧兰^*

来源：中华皮肤科杂志, 2018, 51(04).

• 藜芦属
• NF-E2相关因子2
• 过氧化氢酶
• 超氧化物歧化酶
• 紫外线
• 紫檀芪
• HaCaT细胞

目的探讨紫檀芪对HaCaT细胞急性中波紫外线(UVB)损伤的防御作用及相关机制。方法 MTS法和流式细胞仪检测不同浓度紫檀芪作用后HaCaT细胞增殖活性及凋亡与坏死率, 筛选无毒性紫檀芪浓度。HaCaT细胞随机分为对照组(不做任何处理)、UVB组和2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪组及2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪+ UVB组。Western印迹法检测紫檀芪和UVB处理前后HaCaT细胞内Nrf2核转位情况, 定量PCR检测过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD)的表达, ELISA检测CAT和SOD活性。结果 MTS法和流式细胞仪检测结果显示, 2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪对HaCaT细胞无毒性作用。对照组Nrf2胞质蛋白1.03 ± 0.08、胞核蛋白1.04 ± 0.11;与对照组比较, 2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组Nrf2胞质蛋白和胞核蛋白均无明显变化, UVB组Nrf2胞质蛋白无明显变化, 但Nrf2胞核蛋白显著增加(1.77 ± 0.08, q= 17.24, P < 0.01)。与对照组及UVB组比较, 2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪+ UVB组Nrf2胞质蛋白浓度均显著下降(0.86 ± 0.10、0.87 ± 0.11、0.46 ± 0.11, 均P < 0.05), 胞核蛋白浓度则显著升高(2.38 ± 0.11、2.57 ± 0.11、2.07 ± 0.13, 均P < 0.01)。qPCR显示, 与对照组相比, UVB照射对CAT mRNA表达有明显的抑制作用(P < 0.05), 对SOD mRNA表达则无明显影响(P > 0.05), 2.44、4.88和9.75 μmol/L紫檀芪组CAT和SOD的表达亦均无明显变化(P > 0.05)。然而, 2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT表达的抑制(P < 0.05), 并上调SOD的表达(P < 0.05)。ELISA显示, UVB照射可显著降低HaCaT细胞内CAT和SOD活性(均P < 0.001), 2.44、4.88、9.75 μmol/L紫檀芪可减轻UVB对CAT和SOD活性的抑制作用(P < 0.05), 但其活性仍明显低于对照组(P < 0.05)。结论紫檀芪可通过激活Nrf2通路, 上调其下游抗氧化物酶CAT、SOD表达, 防御HaCaT细胞急性UVB损伤。

• 单位
  广州市皮肤病防治所