miR-34a对膀胱尿路上皮癌细胞Beclin1介导的自噬及吉西他滨化疗敏感性的影响

作者：杨涛; 王刚; 孙福振; 李守宾; 郭留雄; 邓新娜; 刘俊江^*

来源：中国老年学杂志, 2023, 43(02): 384-388.

• miR-34a
• 膀胱尿路上皮癌细胞
• 自噬
• 吉西他滨
• 化疗敏感性

目的 探讨miR-34a对膀胱尿路上皮癌细胞J82中Beclin1介导的自噬及吉西他滨化疗敏感性的影响。方法 研究前期通过吉西他滨诱导，建立J82耐吉西他滨细胞系(J82/Gem),实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测J82细胞和J82/Gem细胞中miR-34a的表达；将J82/Gem细胞随机分为J82/Gem组(未转染)和转染组(miR-34a NC组、miR-34a mimics组),另取J82细胞(J82组),各组均使用含0.5μg/ml的吉西他滨培养24 h。CCK-8法检测各组增殖能力和吉西他滨的半数抑制浓度(IC50);流式细胞仪检测各组细胞凋亡率；单丹磺酰尸胺(MDC)染色法观察各组细胞自噬小体，计算细胞自噬率；Western印迹检测各组细胞中自噬相关蛋白Beclin1、微管相关蛋白轻链(LC)3-Ⅰ、LC3-Ⅱ、p62表达水平。结果 与J82组相比，J82/Gem组和miR-34a NC组细胞miR-34a表达水平、细胞凋亡率和p62蛋白表达水平显著降低，细胞增殖活性、吉西他滨IC50值、细胞自噬率、Beclin1、LC3-I、LC3-II蛋白表达水平显著升高(均P<0.05)。与miR-34a NC组相比，miR-34a mimics组细胞miR-34a表达水平、细胞凋亡率和p62蛋白表达水平显著升高，细胞增殖活性、吉西他滨IC50值、细胞自噬率、Beclin1、LC3-Ⅰ、LC3-Ⅱ蛋白表达水平显著降低(均P<0.05)。结论 过表达miR-34a可通过抑制自噬，提高膀胱尿路上皮癌细胞J82对吉西他滨的化疗敏感性，诱导细胞凋亡。

• 单位
  河北省人民医院