鸡白痢沙门氏菌兔抗血清多抗IgG的纯化与稳定

作者：尤星力; 杨延丽; 苏志国; 张媛; 张松平^*

来源：过程工程学报, 2019, 19(06): 1204-1211.

• 鸡白痢沙门氏菌
• 免疫球蛋白G
• 标准物质
• 纯化
• 等电点
• 离子交换层析
• 稳定

建立了离子交换层析介质一步纯化鸡白痢沙门氏菌兔抗血清获得多抗免疫球蛋白G (IgG)的方法,利用IgG与杂蛋白等电点的差异,指导阴阳离子交换层析介质筛选和操作条件优化;针对多抗IgG易失活的难题,采用差示扫描荧光法为纯化后的IgG筛选稳定剂。结果表明,通过毛细管等电聚焦测得兔抗血清多抗IgG的等电点为6.047.08,阳离子交换介质CM Sepharose FastFlow层析纯化的IgG最高电泳纯度为63.5%,高效液相尺寸排阻色谱测得IgG回收率为15.5%;阴离子交换层析纯化效果更佳,pH 5.5条件下Q Sepharose XL(Q-XL)介质层析获得的IgG最高纯度达99.3%,回收率达67.5%;200 g/L山梨醇对IgG具有最佳稳定作用,IgG的2个热变性温度分别提高了5.52和8.84℃,70℃时山梨醇的稳定作用更明显;以200 g/L山梨醇为稳定剂、用阴离子交换层析介质Q Sepharose XL一步纯化所得IgG具有高纯度、高收率及高稳定性,且制备工艺简单。

• 单位
  中国兽医药品监察所; 中国科学院大学; 中国科学院过程工程研究所