过表达PDCD4逆转胃癌顺铂耐药的初步机制

作者：柳丹; 汤志明; 赵红艳; 柯镜; 白磊; 牛成群; 金佳晴; 武福云; 李珊^*

来源：医学研究生学报, 2019, 32(01): 51-57.

DOI：10.16571/j.cnki.1008-8199.2019.01.012

• 程序性细胞死亡因子
• Akt
• 糖原合酶激酶3β
• 顺铂耐药

目的程序性细胞死亡因子(PDCD4)是近年来新发现的一类促凋亡基因,文中主要研究PDCD4逆转胃癌顺铂耐药的分子机制,为胃癌的耐药机制研究和治疗提供新的基因靶点。方法通过在人胃癌细胞系SGC7901/DDP中稳定过表达PDCD4基因,实验分为对照组(仅转染p CMV质粒),高表达组(仅转染p CMV-PDCD4质粒),对照加药组(转染p CMV质粒并加入顺铂处理),高表达加药组(转染p CMV-PDCD4质粒并加入顺铂处理),进行细胞免疫荧光﹑流式细胞术、RT-PCR和Western blot实验。实验分为空载加药组(转染p CMV质粒并加入顺铂处理)﹑PDCD4加药组(转染p CMV-PDCD4质粒并加入顺铂处理)和PDCD4加激活剂组(转染p CMV-PDCD4质粒,先加入SC79再加入顺铂处理)进行p Akt回补实验。结果高表达组PDCD4蛋白和mRNA表达较对照组明显升高(P<0.05),高表达加药组PDCD4蛋白和mRNA表达较对照加药组明显升高(P<0.05)。流式细胞术检测细胞早期凋亡水平显示,高表达加药组顺铂诱导的细胞早期凋亡率(25.22%)较对照加药组(21.08%)显著增高(P<0.05)。通过Western blot法表明,相较于对照加药组,高表达加药组中p Akt、p GSK3β和BCL-2的表达量均有明显降低(0.73±0.06 vs 0.42±0.04、0.88±0.05 vs 0.53±0.08、1.15±0.13 vs 0.84±0.14),差异均有统计学意义(P<0.05);而相较于对照加药组,高表达加药组中促凋亡蛋白BAK的表达水平则明显升高(1.28±0.09 vs 1.48±0.09),差异有统计学意义(P<0.05)。PDCD4加药组p Akt、p GSK3β表达较空载加药组、PDCD4加激活剂组明显降低(P<0.

• 单位
  湖北医药学院