双组分系统resE/resD基因缺失对单增李斯特菌抗渗透压应激能力及致病性的影响

作者：郭骞; 张钰; 方小伟; 袁梅; 郑明浩; 刘芳; 方春^*

来源：中国畜牧兽医, 2023, 50(09): 3853-3860.

DOI：10.16431/j.cnki.1671-7236.2023.09.041

• 单增李斯特菌
• 双组分系统
• resE/resD基因
• 渗透压应激
• 致病力

【目的】构建单增李斯特菌双组分系统resE/resD基因缺失株，并探究其抗渗透压应激能力及致病性。【方法】利用同源重组方法构建单增李斯特菌双组分系统resE/resD基因缺失株，通过不同环境生长曲线比较分析单增李斯特菌野生株10403S与缺失株ΔresE/resD的生存性能差异；通过应激存活试验探究resE/resD基因缺失对单增李斯特菌抗渗透压能力的影响；通过对结肠癌细胞Caco-2及胃腺癌细胞MGC803进行细胞黏附、侵袭试验以及小鼠毒力试验，评估resE/resD基因缺失对单增李斯特菌细胞黏附与侵袭能力及小鼠致病性的影响。【结果】生长曲线结果显示，resE/resD基因缺失不影响单增李斯特菌正常生长，在5%NaCl条件下缺失株ΔresE/resD生长能力弱于野生株10403S,平台期抗渗透压应激能力显著降低(P<0.05)。应激存活试验结果表明，在10%NaCl条件下应激处理1 h后，缺失株ΔresE/resD存活率极显著低于野生株10403S(P<0.01)。Caco-2及MGC803细胞侵袭试验结果显示，缺失株ΔresE/resD对细胞黏附能力显著减弱(P<0.05),且细胞侵袭能力极显著降低(P<0.01)。小鼠毒力试验结果显示，缺失株ΔresE/resD小鼠脾脏与肝脏中细菌载量极显著或显著低于野生株10403S(P<0.01;P<0.05)。【结论】双组分系统resE/resD基因缺失不影响单增李斯特菌野生株10403S正常生长，但缺失株ΔresE/resD表现出抗渗透压应激能力下降，且减弱了单增李斯特菌对细胞黏附侵袭力和小鼠致病性。

• 单位
  长江大学; 动物科学学院