NF-κB通路在单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化中的作用

作者：李青; 吕林莉; 郑敏; 马坤岭; 张晓良; 刘必成

来源：中华肾脏病杂志, 2011, 27(11): 825-830.

DOI：10.3760/cma.j.issn.1001-7097.2011.11.008

• 单核细胞
• NF-κB
• 抗原
• CD18
• 胞间黏附分子1
• 上皮间充质转分化

目的 观察单核细胞(U937细胞)对人近端肾小管上皮细胞(HK-2细胞)转分化的影响及其分子机制.方法 将HK-2细胞与人单核细胞系U937细胞共培养；倒置相差显微镜观察HK-2细胞形态；Western印迹、实时荧光定量PCR法检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、纤连蛋白(FN)、E钙黏蛋白( E-cadherin)和胞间黏附分子1(ICAM-1)表达；BCECF-AM荧光染色法测定单核细胞黏附；流式细胞仪法检测HK-2细胞表面分子ICAM-1表达；基因芯片筛选HK-2细胞基因变化；利用信号阻断剂阻断基因芯片筛选出的信号通路,进一步验证单核细胞诱导肾小管上皮细胞转分化的分子机制.结果 单核细胞可直接诱导HK-2细胞发生形态变化,减少HK-2细胞E-cadherin表达(均P＜0.05),并上调α-SMA、FN表达(均P＜0.05).应用CD18抗体阻断CD18-ICAM-1可抑制单核细胞黏附及其诱导的HK-2细胞形态变化.基因芯片结果显示,NF-κB信号通路分子CC亚族趋化因子配体20( CCL20)、白细胞介素(IL)2、IL-8、脂磷壁酸(LTA)及血小板内皮细胞黏附分子1(PECAM1)表达明显增加(均P＜ 0.05).NF-KB信号阻断剂吡咯烷二硫氨基甲酸(PDTC)能显著抑制HK-2细胞形态变化及表面ICAM-1表达,抑制单核细胞诱导的肾小管上皮细胞转分化.结论 单核细胞通过CD18分子与HK-2细胞表面ICAM-1结合,从而启动NF-κB信号通路介导的特定基因转录,最终导致肾小管上皮细胞发生转分化.

• 单位
  东南大学附属中大医院; 东南大学