摘要
目的评价线粒体ATP敏感性钾通道(mitoKATP通道)在降钙素基因相关肽(CGRP)减轻新生大鼠心肌细胞缺氧复氧损伤中的作用。方法取原代培养的新生1~3 d SD大鼠心肌细胞,在含有10%胎牛血清培养基中培养,细胞接种于6孔细胞培养板,采用随机数字表法分为5组(n=10):正常对照组(C组)、缺氧复氧组(AR组)、CGRP+缺氧复氧组(CGRP组)、CGRP+mitoKATP通道阻滞剂(5-HD)+缺氧复氧组(5-HD组)、CGRP+CGRP受体阻滞剂CGRP8-37+缺氧复氧组(CGRP8-37组)。除C组,其余4组均缺氧3 h,复氧2 h;CGRP组缺氧前2 h加入终浓度为0.1 nmol/L CGRP;5-HD组于缺氧前2.5 h加入终浓度为500μmol/L 5-HD,30 min后加入终浓度为0.1 nmol/L CGRP;CGRP8-37组于缺氧前2.5 h加入终浓度为1 nmol/L CGRP8-37,30 min后加入终浓度为0.1 nmol/L CGRP。于缺氧复氧后检测心肌细胞凋亡情况,计算凋亡指数(AI)、乳酸脱氢酶(LDH)活性,JC-1荧光法测定线粒体膜电位(Δψm)的变化,即JC-1多聚体/单聚体的比值。结果 AR组AI明显高于C组(P<0.01)LDH活性明显强于C组(P<0.01),JC-1多聚体/单聚体的比值明显低于C组(P<0.01)。CGRP组和5-HD组AI明显低于AR组(P<0.05),LDH活性明显弱于AR组(P<0.01),JC-1多聚体/单聚体的比值明显高于AR组(P<0.01)。5-HD组和CGRP8-37组AI明显高于CGRP组(P<0.01),LDH活性明显强于CGRP组(P<0.01),JC-1多聚体/单聚体的比值明显低于CGRP组(P<0.01)。结论 CGRP可以激活新生大鼠心肌细胞膜CGRP受体,通过激活mitoKATP通道,减少心肌细胞缺氧复氧损伤。
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单位山西医科大学第一医院