转移消失蛋白B与微囊蛋白-1在肝细胞癌中的相互作用

作者:黄修燕; 黄自丽; 许永华; 郑起; 周俭; 汤钊猷
来源:中华实验外科杂志, 2017, 34(06): 963-966.
DOI:10.3760/cma.j.issn.1001-9030.2017.06.019

摘要

目的探讨转移消失蛋白B(MIM-B)与微囊蛋白-1(caveolin-1)在肝细胞癌细胞中的相互作用。方法构建携带MIM-B与FLAG融合基因的pcDNA3.1载体,脂质体法转染Hep3B、SMMC7721细胞。通过细胞免疫荧光以及共聚焦显微镜检测MIM-B蛋白与caveolin-1蛋白共定位;应用内、外源免疫共沉淀确认相互作用;以Hep3B、SMMC7721以及MHCC97H细胞为研究模型,分成空载体组、MIM-B与FLAG融合基因组,进行免疫共沉淀实验。结果成功构建携带MIM-B与FLAG融合基因的pcDNA3.1载体,pcDNA3.1-MIM-B-FLAG转染效率为90.0%以上,显著表达MIM-B。共聚焦显微镜结果显示MIM-B能沉淀caveolin-1;MIM-B与caveolin-1共定位;内、外源免疫共沉淀结果显示MIM-B与caveolin-1相互作用。结论MIM-B与caveolin-1在肝癌细胞中共定位并相互作用。

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