miR-203靶向调控CUL2对HPV16阳性宫颈癌细胞生物学特性的影响

作者：李亚芹; 刘亚涛; 张宏蕾; 赵卫红^*

来源：解放军医学杂志, 2022, 47(10): 968-975.

• 宫颈癌
• 微小RNA 203-3p
• 枯灵素2
• 人乳头瘤病毒16型

目的 探讨微小RNA 203-3p(miR-203)靶向调控枯灵素2(CUL2)对人乳头瘤病毒16型(HPV16)阳性宫颈癌细胞生物学特性的影响。方法 收集2018年9月-2019年9月于山西医科大学第二医院妇产科行宫颈癌筛查，HPV检测为单一HPV16阳性，病理检查为宫颈鳞癌(SCC)的样本及相应癌旁组织(对照组)各10份。采用实时定量反转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测SCC与相应癌旁组织，以及人SCC细胞(SiHa)与人永生化表皮细胞(HaCaT)中miR-203的表达。采用GO和KEGG富集法分析miR-203参与的功能和通路，TargetScan网站及双荧光素酶报告基因实验验证miR-203与CUL2的靶向调控作用。将miR-203模拟物或抑制剂转染至SiHa细胞，建立过表达或低表达miR-203的细胞模型，采用qRT-PCR和Western blotting检测CUL2 mRNA及蛋白的表达；采用CCK-8法、划痕实验、Annexin Ⅴ-APC/PI双染色法评估SiHa细胞的增殖、迁移和凋亡能力。结果 qRT-PCR检测分析结果显示，与相应癌旁组织和HaCaT细胞相比，miR-203在SCC组织和SiHa细胞中的表达水平均明显降低(P<0.01)。GO和KEGG富集结果显示，miR-203广泛参与泛素化过程并与恶性肿瘤参与的信号通路有关。TargetScan与双荧光素酶报告基因实验表明，miR-203与CUL2存在靶向调控关系(P<0.01)。qRT-PCR及Western blotting结果表明，过表达miR-203时，CUL2 mRNA及蛋白表达水平均明显降低(P<0.05或P<0.01)，而低表达miR-203则可上调CUL2 mRNA及蛋白的表达(P<0.01)。CCK-8、划痕实验和Annexin Ⅴ-APC/PI双染结果显示，过表达miR-203可降低SiHa细胞的增殖率和迁移率(P<0.01)，升高细胞凋亡率(P<0.05)；相反，低表达miR-203可升高SiHa细胞的增殖率和迁移率(P<0.01)，降低细胞凋亡率(P<0.01)。结论　miR-203可能通过靶向CUL2抑制HPV16阳性宫颈癌细胞SiHa的生物学特性，有望成为宫颈癌诊断和治疗的一个新的候选基因。

• 单位
  第二临床医学院; 基础医学院; 山西医科大学; 山西医科大学第二医院