扁果枸杞肌动蛋白基因片段的克隆及其表达特征分析

作者：袁惠君^*; 李学勇; 高泽; 王春梅; 李虎军

来源：食品与发酵工业, 2019, 45(06): 48-53.

DOI：10.13995/j.cnki.11-1802/ts.018995

• 扁果枸杞
• 肌动蛋白
• 基因克隆
• 序列分析
• RT-PCR

为克隆扁果枸杞(Lycium barbarum Bianguo)肌动蛋白基因作为基因表达模式分析的内参基因,根据几种茄科植物肌动蛋白氨基酸序列保守区设计引物,以扁果枸杞3周龄叶总RNA为模板,采用RT-PCR的方法扩增肌动蛋白基因片段并连接到p MD18-T载体上,阳性克隆经PCR检测后测序。结果表明,该基因片段长598 bp,编码198个氨基酸,与枸杞(Lycium chinense)核苷酸序列的相似度和同源性分别达97%和100%,说明是肌动蛋白基因片段,命名为Lb ACT。荧光定量PCR分析表明,盐处理下Lb ACT基因在各器官中的Ct值稳定,可作为内参基因用于研究扁果枸杞功能基因的表达模式分析。

• 单位
  草地农业科技学院; 兰州大学; 兰州理工大学; 中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所; 草地农业生态系统国家重点实验室