枸杞多糖在siNrf2胸主动脉血管内皮细胞氧化应激损伤中的作用

作者：朱玲勤; 胡小辉; 高媛媛; 薛姝婧; 李光华^*

来源：宁夏医科大学学报, 2022, 44(01): 11-16.

DOI：10.16050/j.cnki.issn1674-6309.2022.01.003

• 小干扰RNA
• 内皮细胞
• 氧化应激
• Keap1/Nrf2信号通路
• 枸杞多糖

目的 探讨枸杞多糖(lycium barbarum polysaccharide,LBP)对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导主动脉血管内皮细胞氧化应激损伤的保护机制。方法 通过应用小干扰RNA[siRNA(50 nmol)]转染大鼠胸主动脉内皮细胞(rat thoracic aortic endothelial cell,RTAEC),对Nrf2进行基因沉默,检测转染效率、筛选最佳siRNA后,对沉默Nrf2基因分组:空白对照组、Ang Ⅱ组、Ang Ⅱ+LBP组、沉默空载组(siNC组)、siNC+Ang Ⅱ+LBP组、沉默Nrf2组(siRNA组)、siRNA+Ang Ⅱ+LBP组。Western blot检测Nrf2、P-Nrf2的蛋白表达水平在Ang Ⅱ+LBP组与siRNA+Ang Ⅱ+LBP组的变化。ELISA检测丙二醛(MDA)、谷胱甘肽(GSH)、过氧化氢酶(CAT)、总抗氧化能力(T-AOC)的含量变化。结果 转染效率检测结果显示:荧光显微镜下观察到带有荧光标记的siRNA转染内皮细胞的效率在80%以上。与空白对照组比较,siRNA5组的Nrf2蛋白表达降低(P <0.05)。与空白对照组比较,siRNA5组的Nrf2的mRNA表达降低(P<0.05)。转染目的 siRNA实验结果显示:与Ang Ⅱ+LBP组比较,siRNA+Ang Ⅱ+LBP组的Nrf2蛋白表达下降(P<0.05)。与Ang Ⅱ+LBP组比较,siRNA+Ang Ⅱ+LBP组的MDA的表达水平升高(P <0.05),GSH、CAT、T-AOC的表达水平降低(P均<0.01)。结论 LBP可能通过增加内皮细胞中Nrf2的蛋白表达水平,提高其抗氧化应激能力,达到保护血管内皮细胞功能的作用。

• 单位
  基础医学院; 宁夏医科大学