邻苯二甲酸二（2-乙基己基）酯对3T3-L1前脂肪细胞成脂分化和脂肪分解的影响

作者：欧阳碧云; 王俊程; 赵秀兰^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2022, 36(09): 673-679.

• 邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯
• 脂肪分化
• 脂肪分解
• 肥胖

目的 观察邻苯二甲酸二(2-乙基己基)酯(DEHP)对3T3-L1前脂肪细胞脂质代谢的影响及其可能的作用机制。方法 采用鸡尾酒诱导法对3T3-L1前脂肪细胞诱导脂肪分化，诱导的同时给予DEHP 0(细胞对照组)，3.125,6.25,12.5,25和50μmol·L-1，诱导过程中每天显微镜下观察3T3-L1细胞脂滴大小和数量的变化。诱导完成(7 d)后细胞继续培养3 d(第10天)，显微镜下观察油红O染色后细胞内脂滴大小和数量，甘油三酯(TG)测定试剂盒测定细胞培养液中(细胞外)TG水平，分光光度法测定油红O染色细胞洗脱液中(细胞内)脂肪含量，Western印迹法检测细胞中脂肪TG脂肪酶(ATGL)、激素敏感脂肪酶(HSL)、Ser660和Ser563位点磷酸化HSL及磷酸化蛋白激酶A底物蛋白表达水平，并采用Western印迹法和免疫荧光法检测细胞中解偶联蛋白1(UCP1)蛋白表达水平。结果 显微镜下观察发现，诱导分化第5天，细胞对照组细胞内尚未发现脂滴，DEHP 3.125～50μmol·L-1组细胞内均出现小脂滴；诱导分化第6天，细胞对照组开始出现脂滴，DEHP 3.125～50μmol·L-1组脂滴数量增多；第10天，DEHP 12.5,25和50μmol·L-1组油红O着色细胞与细胞对照组相比增多，尤其DEHP 50μmol·L-1组可见较大脂滴和“指环”样脂肪细胞。与细胞对照组相比，DEHP 3.125～50μmol·L-1组细胞外TG水平和细胞内脂肪含量均明显升高(P<0.01);DEHP12.5～50μmol·L-1组细胞ATGL蛋白水平明显下降(P<0.01);DEHP 3.125～50μmol·L-1组细胞中蛋白激酶A活性、HSL磷酸化水平、UCP1表达水平和UCP1表达阳性细胞数目明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论DEHP促进3T3-L1前脂肪细胞成脂分化，并抑制脂肪分化细胞脂肪分解。

• 单位
  山东大学; 公共卫生学院