大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因的克隆、表达及功能研究

作者：张晓; 吴海珍; 卫玮; 徐红艳; 张元兴

来源：食品与药品, 2009, (09): 15-19.

• 鱼类Ⅳ型抗冻蛋白
• RACE
• 抗冻活性
• 大黄鱼 fi sh type IV AFP
• RACE
• antifreeze activity
• large yellow croaker

目的研究大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因编码产物的功能。方法从大黄鱼肝脏SSHcDNA文库筛选到的类似极地鱼类Ⅳ型抗冻蛋白的EST序列出发,用RACE方法克隆Ⅳ型抗冻蛋白基因全长cDNA,RT-PCR分析此基因在大黄鱼不同组织内的表达。构建原核表达载体pGEX-4T-Lycafp并表达蛋白质,亲和层析纯化GST融合蛋白,分析它的体外细菌抗冻保护作用。结果大黄鱼类Ⅳ型抗冻蛋白基因cDNA全长664bp,包含372bp开放阅读框,编码124个氨基酸,经SignalP3.0软件预测其N端前20位氨基酸为信号肽,氨基酸序列与长角杜夫鱼Ⅳ型抗冻蛋白同源性高达52%;RT-PCR分析表明其mRNA仅在肝脏表达;重...

• 单位
  生物反应器工程国家重点实验室; 华东理工大学