创伤弧菌溶细胞素体外诱导人脐静脉内皮细胞凋亡及其在细胞中的定位

作者：赵金方; 丁威; 赵旭鸿; 陆淼泉; 严杰

来源：中华微生物学和免疫学杂志, 2008, (11): 976-981.

• 创伤弧菌
• 溶细胞素
• 重组表达
• 人脐静脉内皮细胞
• 凋亡 Vibrio vulnificus
• Cytolysin
• Recombinant expression
• Human umbilical vein endothelial cell
• Apoptosis

目的了解创伤弧菌溶细胞素(Vibrio vulnificus cytolysin,VVC)诱导人脐静脉内皮细胞(HUVEC)凋亡作用及其机制。方法采用PCR扩增创伤弧菌GTC333株VVC编码基因vvhA,T-A克隆后测序并构建vvhA基因原核表达系统E.coli BL21DE3~(pET-42a-vvhA)。采用Ni-NTA亲和层析法提纯目的重组蛋白rVVC,SDS-PAGE联合Bio-Rad凝胶图像分析系统确定rVVC表达量及提取物纯度。采用溶血试验检测rVVC溶解兔红细胞的活性。2,4-二硝基苯肼比色法和四苯硼钠比色法分别测定rVVC作用的HUVEC培养物上清中乳酸脱氢酶(LDH)和K~...

• 单位
  温州医学院; 浙江大学