巨型艾美耳球虫裂殖子的分离和纯化

作者:张榕珍; 王黎霞; 郭许情; **; 张天宇; 张建军; 安健*
来源:北京农学院学报, 2021, 36(03): 67-71.
DOI:10.13473/j.cnki.issn.1002-3186.2021.0312

摘要

【目的】为了获得纯净的巨型艾美耳球虫(Eimeria maxima)裂殖子。【方法】对25日龄白羽肉鸡口服接种3×105巨型艾美耳球虫卵囊,在其感染后48~124 h取十二指肠末端到卵黄蒂后5 cm处肠段,收集裂殖子并计数,确定分离裂殖子的最佳时间;将所取肠段均分为5段,分别对裂殖子进行计数,筛选分离裂殖子的最佳肠段;通过DEAE-52纤维素柱层析对裂殖子进行纯化并分管收集,确定收集较高纯度裂殖子的最佳时间。【结果】在感染后84 h所收集的裂殖子最多;此外,从空肠中后段及空肠末端肠段中分离出较多数量的裂殖子,占总数的62%以上;通过DEAE-52纤维素柱层析获得44 mL纯度较高的裂殖子。【结论】分离巨型艾美耳球虫裂殖子的最佳时间为感染后84 h,最佳肠段为空肠后段,收集1~44 mL洗脱液能够获得纯度较高的裂殖子。

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