牛病毒性腹泻病毒1型和2型双重RT-PCR检测方法的建立

作者：**栋; 熊浩; 季新成; 冉多良; 彭武丽; 于学辉; 史茜

来源：动物医学进展, 2013, (10): 21-25.

DOI：10.16437/j.cnki.1007-5038.2013.10.013

• 牛病毒性腹泻病毒
• GAPDH基因
• 基因分型
• 内标
• 双重RT-PCR BVDV
• GAPDH gene
• genetic typing
• internal amplification control
• duplex RT-PCR

根据GenBank已发表的牛病毒性腹泻病毒(BVDV)基因1型和2型毒株的5′端非编码区(5′-UTR)保守序列的差异,设计2对特异性引物,并以牛GAPDH基因为内标,设计1对特异性引物,建立牛病毒性腹泻病毒分型与内标三重RT-PCR检测方法。3对引物可分别扩增出的片段大小为127、94、152bp,与预期大小相符。经反应条件优化,该方法的灵敏度为10°TCID50,与不加内标检测灵敏度相当。经临床样品检测验证,该方法具有较好的特异性和重复性,可用来对牛病毒性腹泻病毒分型进行快速准确的检测。

• 单位
  新疆农业大学; 新疆出入境检验检疫局