水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞TGF-β/Smad通路及上皮-间质转化的影响

作者：杨吉帆; 张涛^*; 李春梅

来源：中国免疫学杂志, 2022, 38(10): 1201-1206.

• 电离辐射
• 水蛭提取物
• 肺泡上皮细胞
• 上皮-间质转化
• TGF-β/Smad通路

目的：探讨水蛭提取物对电离辐射诱导的肺泡上皮细胞L2上皮-间质转化(EMT)影响及机制。方法：采用MTT法检测水蛭提取物对L2细胞活力的影响以筛选适合的作用浓度。将体外培养的L2细胞分为正常对照组、8 Gy(60Coγ照射剂量)组和8 Gy+0.50 g/L水蛭提取物组和8 Gy+1.00 g/L水蛭提取物组，倒置显微镜观察L2细胞形态变化，免疫荧光法检测L2细胞中E-钙黏附蛋白(E-cadherin)和α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)表达，RT-qPCR和Western blot检测E-cadherin、α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3 mRNA及蛋白表达，Transwell细胞迁移实验和划痕实验检测细胞迁移能力。结果：与0 g/L相比，2.00和4.00 g/L水蛭提取物作用48 h后L2细胞存活率显著降低(P<0.05),0.125、0.25、0.50和1.00 g/L水蛭提取物对L2细胞存活率无明显毒性作用(P>0.05)，因此选取0.50和1.00 g/L水蛭提取物进行后续实验。8 Gy60Coγ照射后L2细胞由鹅卵形变为长梭形，给予0.50和1.00 g/L水蛭提取物后细胞上述形态变化逐渐恢复。与正常对照组相比，8 Gy60Coγ照射后L2细胞E-cadherin荧光强度减弱，α-SMA荧光强度增强，E-cadherin表达显著降低，α-SMA、TGF-β、Smad2、Smad3表达显著升高，细胞迁移数和划痕愈合率显著升高(P<0.05);0.50和1.00 g/L水蛭提取物作用后可明显逆转8 Gy60Coγ照射所引起的上述变化(P<0.05)。结论：水蛭提取物可抑制电离辐射诱导的肺泡上皮L2细胞EMT，其作用机制可能与抑制TGF-β/Smad通路活化有关。

• 单位
  重庆医科大学附属第一医院