激光共聚焦显微镜观察阴道来源乳杆菌生物膜的形成

作者：吴丽杰; 王奔; 廖秦平; 张瑞

来源：北京大学学报(医学版), 2015, 47(06): 933-938.

• 乳杆菌属
• 生物膜
• 阴道
• 显微镜检查,共焦

目的:采用激光共聚焦显微镜技术动态观察一株女性阴道来源卷曲乳杆菌生物膜的形成过程。方法:使用体外盖玻片生物膜培养法,培养阴道来源卷曲乳杆菌的生物膜,在培养2、4、8、12、16、20、24、48、72、96、120 h后取出盖玻片,用异硫氰酸荧光素标记的刀豆蛋白A(fluorescein isothiocyanate-conjugatedconcanavalin A,FITC-con A)和碘化丙啶(andpropidium,PI)双重免疫荧光染色,激光共聚焦显微镜(confocal laser scanning microscopy,CLSM)观察卷曲乳杆菌生物膜形成过程与特点。结果:获得生物膜形成过程不同时间点的CLSM图像,观察到卷曲乳杆菌在4h即开始有散在的细菌黏附于盖玻片上,为可逆吸附期;820 h细菌黏附量逐渐增加,进入不可逆吸附期,20 h细菌聚集成团,生物膜初步形成;2448 h形成大片的生物膜菌落,细菌镶嵌在大量多糖基质中,结构紧密,形态稳定,生物膜成熟;72 h后生物膜菌落开始解聚。培养20 h乳杆菌生物膜密度为42.7×10-3±6.83×10-3,24 h上升为102.5×10-3±23.14×10-3,两者相比差异具有统计学意义(P<0.05),表明培养24 h乳杆菌生物膜形成。结论:该株阴道来源卷曲乳杆菌在体外可形成生物膜,24 h可形成成熟的生物膜,72 h生物膜开始解聚再定植。

• 单位
  中日友好医院; 北京大学第一医院