葡萄糖神经酰胺合成酶siRNA表达载体的构建

作者：张艳; 周慧聪; 陈辉; 乐晓萍; 夏彬; 陈香红; 张钦宪

来源：郑州大学学报(医学版), 2007, (03): 467-470.

DOI：10.13705/j.issn.1671-6825.2007.03.028

• 葡萄糖神经酰胺合成酶
• siRNA
• 表达载体
• 胃肿瘤 glucosylceramide synthase
• siRNA
• expression vector
• gastric neoplasm

目的构建针对葡萄糖神经酰胺合成酶(GCS)mRNA的siRNA表达载体,并观察其对转染细胞中GCS表达的影响。方法根据人GCSmRNA编码序列,设计并合成3对针对GCS的发卡状RNA的寡核苷酸,各64个碱基,退火后插入pSUPEREGFP载体重组构建RNAi质粒,进行双酶切及测序鉴定。重组质粒用脂质体包裹转染入SGC7901/VCR细胞,采用RT-PCR检测GCSmRNA表达水平的变化。结果重组构建的载体经酶切鉴定与测序分析,显示特定位点靶序列与设计序列完全一致。转染SGC7901/VCR细胞后,GCSmRNA表达明显降低。结论GCSsiRNA表达载体构建成功,并可有效抑制人胃癌耐药SGC79...

• 单位
  郑州大学; 郑州大学第一附属医院