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摘要
目的建立基于抑制NaCl重吸收作用的利尿药物体外筛选模型,研究21个从石韦中分离的化合物的利尿活性,并通过体内实验进行验证。方法采用犬肾小管上皮细胞MDCK对石韦中21个化合物进行体外利尿活性筛选,确定NaCl体外转运实验的最佳NaCl剂量;将MDCK细胞接种于Transwell小室内,设置对照组、石韦化合物(100μmol/L)组、氢氯噻嗪(100μmol/L)组,给药孵育24 h后,加入NaCl溶液(15 mg/mL),于30 min、2 h、4 h分别取Transwell下室培养液,检测Cl-和Na+吸光度。昆明小鼠随机分为对照组、绿原酸甲酯(10 mg/kg)组、山柰酚(10 mg/kg)组、氢氯噻嗪(10 mg/kg)组,给予药物干预5 d后,检测各组小鼠5 h内的尿量。结果与对照组比较,加入NaCl 30 min,氢氯噻嗪组MDCK细胞Cl-和Na+水平显著降低(P<0.05),绿原酸甲酯组MDCK细胞Na+水平显著降低(P<0.05);加入NaCl 2h,绿原酸甲酯组MDCK细胞Cl-水平显著降低(P<0.05)。与对照组比较,绿原酸甲酯组和氢氯噻嗪组小鼠给药后5 h内的总尿量显著增加(P<0.05);氢氯噻嗪组和绿原酸甲酯组小鼠尿量峰值分别为给药后1.5、2.5h,随后尿量均呈下降趋势。结论绿原酸甲酯可抑制肾小管氯化钠转运,对小鼠具有利尿作用,是石韦中的利尿活性成分。
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