银杏内酯B对癫痫模型大鼠脑保护作用及其机制研究

作者：鲁光辉; 李新峰; 冯亮; 罗玲; 王海华

来源：江苏中医药, 2021, 53(11): 76-80.

DOI：10.19844/j.cnki.1672-397X.2021.11.024

• 癫痫
• 银杏内酯
• 海马
• 动物行为学
• SD大鼠
• 雄性
• 实验研究

目的:探讨银杏内酯B(GB)对癫痫(EP)模型大鼠脑组织的保护作用及其机制。方法:将120只雄性SD大鼠按随机数字表法分为空白对照组、模型组、丙戊酸钠(VPA)组与GB低、中、高剂量组,每组20只。除空白对照组外,其余各组大鼠采用氯化锂-匹罗卡品诱导制备EP大鼠模型。注射匹罗卡品前30 min,空白对照组和模型组腹腔注射生理盐水,GB低、中、高剂量组分别腹腔注射2.5、5、10 mg/kgGB,VPA组腹腔注射300 mg/kgVPA。注射匹罗卡品后2 h内观察各组大鼠行为学变化,记录EP首次发作潜伏期、发作持续时间,参照Racine分级标准对各组大鼠EP发作程度进行分级。注射匹罗卡品24 h后,各组随机取10只大鼠,脑组织固定切片,苏木精-伊红(HE)染色,观察大脑海马组织病理学改变;末端脱氧核苷酰基转移酶介导d UTP切口末端标记(TUNEL)法观察各组大鼠海马区神经元凋亡状况。各组剩余的10只大鼠,于注射匹罗卡品24 h后,取脑剥离海马,研磨匀浆,离心取上清液,黄嘌呤氧化法和钼酸铵法分别检测超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)活力,硫代巴比妥酸法检测丙二醛(MDA)含量,蛋白质免疫印迹(Westernblot)法检测核因子E2相关因子2(Nrf2)、血红素加氧酶-1(HO-1)、核因子-κB(NF-κB)、半胱氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、激活型Caspase-3(Cleaved Caspase-3)蛋白表达。结果:与模型组比较,GB中、高剂量组和VPA组大鼠EP发作潜伏期明显延长、发作持续时间明显缩短(P<0.01),EP发作程度明显降低(P<0.01);海马神经元病变和凋亡状况明显改善,凋亡指数降低(P<0.01);SOD、CAT活力升高且MDA含量降低(P<0.05或P<0.01);Nrf2、HO-1表达上调而NF-κB、Cleaved Caspase-3表达下调(P<0.01),Cleaved Caspase-3/Caspase-3比值降低(P<0.01)。上述指标除CAT活力外,GB对其他指标的改善作用均表现出剂量依赖性;除CAT活力和Caspase-3表达外,高剂量GB对其他指标的影响均显著优于VPA(P<0.05或P<0.01)。结论:GB对EP模型大鼠具有抗痫和脑组织保护作用,其机制可能与激活Nrf2/HO-1信号通路进而抑制氧化应激和细胞凋亡有关。

• 单位
  邯郸市第二医院