长链非编码RNA HOX转录反义RNA靶向miR-206对结直肠癌细胞迁移、侵袭的影响

作者：薛强; 武雪亮^*; 孙光源; 杨东东; 李坤

来源：中国医药导报, 2023, 20(34): 26-30.

DOI：10.20047/j.issn1673-7210.2023.34.05

• 结直肠癌
• 长链非编码RNA
• HOX转录反义RNA
• miR-206
• 细胞侵袭
• 细胞迁移

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA)HOX转录反义RNA(HOTAIR)靶向miR-206对结直肠癌细胞侵袭和迁移的影响。方法 常规培养人结直肠癌HT-29细胞，将合成的HOTAIR si RNA和siRNA control转染于HT-29细胞，设置为si-HOTAIR组、si-con组，未进行转染的HT-29细胞设置为空白组。实时荧光定量聚合酶链反应测定转染效果，Transwell和划痕愈合实验检测HT-29细胞侵袭和迁移情况。生物信息学软件分析HOTAIR与miR-206区域结合位点，构建突变型（HOTAIR 3’UTR mut）和野生型（HOTAIR 3’UTR wt）萤光素酶报告载体，将HOTAIR 3’UTR wt、HOTAIR 3’UTR mut与miR-206 mimic或miR-NC载体共转染至HT-29细胞中，设为HOTAIR 3’UTRwt/miR-NC组、HOTAIR3’UTRwt/miR-206组、HOTAIR3’UTRmut/miR-NC组，HOTAIR3’UTRmut/miR-206组，培养48 h后检测萤光素酶活性。将HOTAIR si RNA和miR-206 inhibitor共转染于HT-29细胞，设置si-HOTAIR+anti-NC组和si-HOTAIR+anti-miR-206组，用Transwell和划痕愈合实验分析细胞侵袭、迁移水平。结果 空白组与si-con组HT-29细胞中HOTAIR m RNA的表达水平比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与si-con组比较，si-HOTAIR组HT-29细胞中HOTAIR m RNA的表达水平降低（P<0.01）。空白组与si-con组HT-29细胞侵袭数目、细胞划痕愈合率比较，差异无统计学意义（P>0.05）；与si-con组比较，si-HOTAIR组HT-29细胞侵袭数目减少，细胞划痕愈合率降低（P<0.01）。与HOTAIR 3’UTR wt/miR-NC组比较，HOTAIR 3’UTR wt/miR-206组中HOTAIR wt的萤光素酶活性下降（P<0.01）；而HOTAIR 3’UTR mut/miR-NC组与HOTAIR 3’UTR mut/miR-206组萤光素酶活性比较，差异无统计学意义（P>0.05）。与si-HOTAIR+anti-NC组比较，si-HOTAIR+anti-miR-206组中miR-206的表达水平降低（P<0.01）。与si-HOTAIR+anti-NC组比较，si-HOTAIR+anti-miR-206组中HT-29细胞的侵袭和迁移率增加（P<0.01）。结论HOTAIR通过负调控miR-206促进HT-29细胞的侵袭和迁移能力。

• 单位
  河北北方学院附属第一医院