草莓镶脉病毒ORFⅡ基因的克隆、原核表达与抗血清制备

作者：蒋磊; 邓竹根; 谢朝阳; 杨友志; 李祥宇; 丁菲; 江彤

来源：植物病理学报, 2013, (01): 20-26.

DOI：10.13926/j.cnki.apps.2013.01.009

• 草莓镶脉病毒
• ORFⅡ基因
• 克隆
• 原核表达
• 多抗血清 Strawberry vein banding virus
• gene ORF Ⅱ
• clone
• prokaryotic expression
• antiserum

用CTAB法从感染草莓镶脉病毒(Strawberry vein banding virus,SVBV)的草莓叶片中提取总DNA,设计特异性引物扩增SVBV中国分离物ORFⅡ基因,克隆并测序。结果表明,SVBV中国分离物ORFⅡ基因全长486 nts,编码161个氨基酸。将其与SVBV美国分离物以及花椰菜花叶病毒属其他成员的ORFⅡ基因相比较,结果表明,SVBV中国分离物ORFⅡ基因与SVBV美国分离物的核苷酸序列相似性最高,达91.2%。将SVBV ORFⅡ基因插入原核表达载体pET32a(+),重组质粒pET-ORFⅡ转化大肠杆菌BL21(DE3)。经IPTG诱导及Ni2+-NTA亲和柱纯化...

• 单位
  安徽农业大学