miRNA-199a-5p靶向CDCA7L对胶质瘤细胞迁移及侵袭的影响

作者：兰伟途^*; 武峰; 何建昌; 兰文达; 王万宏

来源：中华细胞与干细胞杂志(电子版), 2021, 11(05): 272-278.

• 胶质瘤
• miR-199a-5p
• 细胞周期蛋白质类
• 细胞迁移
• 细胞侵袭

目的探讨miR-199a-5p靶向细胞分裂周期相关7样蛋白 (CDCA7L)对胶质瘤细胞迁移及侵袭的影响。方法采用实时荧光定量PCR (RT-qPCR)检测人正常星形胶质细胞HA1800与人胶质瘤细胞株U251中miR-199a-5p表达量;使用Lipofectamine 2000转染试剂盒对U251细胞进行转染,并分别命名为空白组 (正常培养的U251细胞)、miR-NC组 (转染miR-NC)、miR-199a-5p mimic组 (转染miR-199a-5p mimic)、miR-199a-5p mimic+pcDNA组 (共转染miR-199a-5p mimic和pcDNA)、miR-199a-5p mimic+pcDNA-CDCA7L组 (共转染miR-199a-5p mimic和pcDNA-CDCA7L),Transwell实验检测U251细胞迁移、侵袭能力,Western blot检测CDCA7L蛋白表达情况;利用TargetScan软件预测miR-199a-5p和CDCA7L结合位点;双荧光素酶报告基因检测验证miR-199a-5p与CDCA7L靶向关系;HA1800、U251两组细胞间的比较采用两样本t检验;多组间比较采用单因素方差分析,两组间比较采用SNK-q检验。结果与HA1800细胞比较,U251细胞中miR-199a-5p表达水平降低 (1.09±0.26比0.32±0.14),CDCA7L蛋白表达量升高 (0.21±0.02比0.85±0.13),差异具有统计学意义 (P 均 < 0.001)。miR-199a-5p mimic组细胞迁移数、侵袭数及CDCA7L蛋白表达量均低于空白组、miR-NC组(50.12±3.36比94.57±7.14、93.86±6.11;42.53±3.34比71.49±4.35、73.76±4.21;0.25±0.07比0.83±0.12、0.89±0.09),差异具有统计学意义(P均< 0.001)。CDCA7L为miR-199a-5p靶基因。过表达CDCA7L可逆转miR-199a-5p对U251细胞迁移及侵袭的抑制作用 (P < 0.05)。结论在胶质瘤细胞中miR-199a-5p呈低表达,上调miR-199a-5p可能通过靶向抑制CDCA7L蛋白表达,进而抑制胶质瘤细胞的迁移和侵袭。

• 单位
  沧州市人民医院