中成药中沙门氏菌环介导等温扩增快速检测方法的建立及应用

作者：冯润东; 贾首前; 王莉芳; 杨晓莉; 徐长根^*; 张鸿豪

来源：中国药业, 2023, 32(05): 83-87.

• 沙门氏菌
• invA基因
• 引物
• 环介导等温扩增
• 快速检测

目的 建立以invA特异性基因设计合成为引物的沙门氏菌环介导等温扩增（LAMP）快速检测方法。方法 选择沙门氏菌的毒力因子invA基因作为检测模板，采用Primer Exploer V5软件设计3组LAMP引物[正向外引物（F3）、反向外引物（B3），正向内引物（FIP）、反向内引物（BIP），正向环引物（LF）、反向环引物（LB）]，以4种沙门氏菌（甲型副伤寒沙门氏菌、乙型副伤寒沙门氏菌、丙型副伤寒沙门氏菌、鼠伤寒沙门氏菌）和3种非沙门氏菌（金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、产志贺氏毒素大肠埃希氏菌）的细菌DNA为模板，进行LAMP快速检测。结果 在反应温度为65℃、反应时间为60 min条件下，即可快速检测4个亚种沙门氏菌，其检测灵敏度可达10 cfu/mL，且试验结果易于观察，筛选的引物特异性良好。结论 所建立的方法灵敏度高、特异性好、检测快速，可应用于中成药中沙门氏菌的快速检测。