摘要
目的研究力对不同根吸收时期乳牙和恒牙牙周膜干细胞(periodontalligamentstemcell, PDLSC)生物学特性的影响, 探索乳牙生理性根吸收的相关机制。方法收集2019年4月至2020年4月第四军医大学口腔医学院儿童口腔科因乳牙滞留拔除的健康乳切牙12颗和口腔颌面外科因正畸需要拔除的健康第一前磨牙6颗, 根据牙齿类型及牙根吸收程度分为:乳牙牙根未吸收组(the unresorbed group, UN组)、乳牙牙根吸收组(the resorbed group, R组)和恒牙组(the permanent teeth group, P组), 每组各6颗。从各组牙周膜分离原代PDLSC并进行传代培养, 对各组PDLSC分别加载0~45、0~90、0~135、0~180、0~225、0~270 kPa的流体动态压力, 细胞计数试剂盒(cell counting kit-8, CCK-8)法分别检测加载压力后1~7 d的细胞增殖能力;对各组PDLSC分别加载0~45、0~90、0~135、0~180、0~225 kPa的流体动态压力, 流式细胞技术检测细胞凋亡水平, 各时间各组均以未加载压力作为对照。加载0~90 kPa的流体动态压力作用于细胞骨架, 纤维型肌动蛋白(fibrous actin, F-actin)染色方法观察细胞微丝的改变。结果不同流体动态压力下, 各组PDLSC均具有一定自我增殖能力。UN组和R组在0~180 kPa及以下动态压力作用3~7 d的A值均显著高于P组(P<0.05), 但在0~270 kPa压力作用下1~7 d, UN组、R组和P组A值差异均无统计学意义(P>0.05)。UN组和R组PDLSC在0~180 kPa及以下动态压力作用下的A值与各自对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05), 但在0~225及0~270 kPa压力作用下, 3~7 d的A值与各自对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05);P组PDLSC在0~225 kPa及以下压力作用下1~7 d的A值与其对照组相比差异均无统计学意义(P>0.05), 在0~270 kPa压力作用下, 仅3 d(1.386±0.131)和5~7 d的A值(分别为:1.728±0.226、2.029±0.168、2.263±0.210)分别与各自对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。细胞凋亡结果显示, 相比各组对照组, UN组、R组和P组PDLSC分别在0~90 kPa及以上、0~135 kPa及以上和0~180 kPa及以上流体动态压力作用下A值差异有统计学意义, 细胞凋亡显著升高(P<0.05)。F-actin染色结果显示, 在0~90 kPa压力下, 各组细胞微丝均呈绿色丝状, R组和P组细胞微丝沿细胞长轴排列, UN组细胞微丝部分纤维结构改变, 排列更紧密。结论不同根吸收时期PDLSC受到力学刺激后的生物学特性均发生改变, 牙根未吸收期乳牙PDLSC对力学刺激更敏感。
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单位第四军医大学; 军事口腔医学国家重点实验室