潜阳育阴颗粒对TGF-β_(1)诱导的肾小管上皮细胞间充质转分化的影响

作者：孔雪; 黄国顺; 韩雪玲; 张金波; 戴晶; 商锰男; 邹冲^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2023, 1-8.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20231008

• 潜阳育阴颗粒
• 转化生长因子-β_(1)(TGF-β_(1))
• 上皮细胞间质转化
• EMT

目的：通过观察潜阳育阴颗粒对肾小管上皮细胞表型的影响，探讨其对肾间质纤维化的干预作用。方法：将肾小管上皮细胞(HK-2)用不同浓度的转化生长因子(TGF)-β1(0、5、10、15、20、25 μg·L-1)刺激24 h，用倒置相差显微镜观察细胞形态及生长状态，结合Western blot结果选取最合适的TGF-β1浓度20 μg·L-1用于后续实验。将HK-2细胞分为6组：空白组；TGF-β1组(质量浓度为20 μg·L-1)；潜阳育阴颗粒低、中、高剂量组(质量浓度分别为0.5、1、2 g·L-1)；缬沙坦组(浓度为1×10-5 mol·L-1)。CCK-8法测各组细胞活性；划痕实验检测细胞迁移能力；Transwell法检测细胞侵袭能力；Western blot检测纤连蛋白(fibronectin，FN)、E-钙黏蛋白(E-cadherin)、α-平滑肌激动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(vimentin)、Ⅰ型胶原(Collagen type Ⅰ)、Ⅳ型胶原(Collagen type Ⅳ)等相关蛋白表达水平。结果：TGF-β1刺激肾小管上皮细胞EMT的发生具有一定时间依赖性和浓度依赖性。与空白组比较，TGF-β1组给药浓度越高，干预时间越长，细胞呈长梭形改变越明显，迁移及侵袭能力显著增强，FN、α-SMA、vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅳ蛋白表达水平明显升高(P<0.05，P<0.01)，同时E-cadherin蛋白表达水平下降(P<0.05)。与TGF-β1组比较，潜阳育阴颗粒各组均能维持正常细胞形态，细胞迁移及侵袭能力受到抑制，FN、α-SMA、vimentin、Collagen Ⅰ、Collagen Ⅳ蛋白表达减少(P<0.05，P<0.01)，E-cadherin蛋白表达明显恢复(P<0.05)。结论：潜阳育阴颗粒能够通过减少间质细胞表型表达，增加上皮细胞表型表达，逆转TGF-β1诱导的肾小管上皮细胞间质转化。

• 单位
  南京中医药大学